,邀请高校、科研院所公共技术平台的老师分享技术心得和经验,方便生命科学领域研究人员了解相关技术进展,学习仪器使用方法。本篇为深圳湾实验室生物影像平台助理工程师黄诗娴供稿。在上一篇中作者详述了转盘共聚焦显微镜的技术原理、技术优势、历史沿革、功能和主要应用。在本篇中,作者介绍了深圳湾实验室生物影像平台的各类生物成像设备,并根据自己在深圳湾实验室生物影像平台管理工作中的经验总结了平台管理的方法和建议,分享给广大用户。
理方法和良好的设备日常维护可以保障仪器正常运转,有利于延长仪器设备的使用寿命,提高实验室的综合效益。因此,设备平台管理人员务必要做好仪器设备的管理工作,以下分享几点仪器设备的管理心得:
1、做好仪器设备全生命周期管理,包含仪器设备的选型购置、安装、运行使用、维护维修、升级改造、调拨流通、报废等方面的规划化及信息化管理。其中较为重要的部分包含:(1)设备选型购置及安装:要做好同类设备调研、性能比较及专家论证等工作,按需购置。对安装好的仪器设备应做好性能测试及验收工作,录入固定资产系统管理。
(2)设备日常运行管理:为确保仪器能正常运行,需提供适宜的仪器运行环境,维持好设备间适宜的温湿度和洁净度,做好仪器的日常清洁与保养,设备安全管理等工作。配置一个功能齐全、方便快捷的仪器预约系统,这对管理员管理仪器,使用者预约使用仪器及后续统计收费等尤为重要。制订平台管理条例及奖惩制度,做好仪器运行日志,使用登记及数据传输系统管理等工作。
、提升仪器设备开放共享水平及运行效率。为了做到物能尽其用,除了要按需采购、技术人员管理及水平到位、完善平台仪器设备功能之外,还需制定完善的内外单位使用规程,建立大型仪器共享平台,方便内外单位人员使用设备。提高平台知名度,如举办显微图像摄影大赛、开展成像培训班,分享实验成功案例,提供具有权威性的成像检测报告等,吸引更多科研人员前来使用。
、加强设备使用者管理,严格规范操作。需定期举行小型上机培训、大型培训班及相关原理应用培训讲座,严格要求使用者参加仪器培训及考核,按照要求使用设备。增强使用者对设备的爱护意识和安全意识,要求其严格遵守平台制定的规章制度。
、重视平台技术队伍建设,提高设备管理人员技术能力水平。设备管理人员需完成设备管理维护和培训考核、设备相关数据收集统计、仪器开放共享和固定资产管理等基础工作。在此基础上,鼓励并安排管理人员参加各类技术交流和技术培训,支持平台主办或承办相关技术交流会议,及时了解本领域的技术发展动态,学习并掌握最先进的技术方法,从而提升管理人员的科研服务水平和管理水平,提高技术开发、技术创新及管理能力。重视平台技术队伍建设,建立技术管理人员的考核激励机制,调动人员积极性,做到人能尽其才。做好平台文化建设,以工匠精神为核心,营造浓厚的创新文化。
5、积极推动平台发展,做好仪器共享,技术共享和仪器创新。要丰富平台仪器设备及技术,可引入各类样机进行试用,尤其是国产仪器设备,助力国产设备发展。加强与各个单位的合作,例如实验室与蔡司签订合作协议并建立联合成像中心,建立了显微镜教学实验室,拓展了生物影像平台的前沿技术获取渠道,夯实了平台的科研支撑能力,为实验室的发展做出了积极贡献;与奥林巴斯等签订合作协议,获取了更精细的技术支撑服务,共同成立专项科研基金,用于支持显微成像领域的科研发展。大力推动平台仪器设备自主研发及技术创新,以技术创新成果支撑,推动平台发展。
集中配置了三百多台大型仪器设备,是实验室多层次全方位技术支撑体系的重要组成部分,为实验室的科学研究和人才培养提供硬件支撑和技术服务。此外,实验室公共技术平台已向深圳市约200家企事业单位提供了仪器开放共享服务,助力了深圳市乃至粤港澳大湾区生命健康产业发展。
共聚焦类显微镜:包含各类激光点扫描共聚焦和转盘共聚焦显微镜,如ZEISS LSM900/980、Olympus SpinSR、Andor四激光/七激光转盘共聚焦。除常规成像功能外,还包含Airyscan,FRET,FRAP,超分辨模块、光刺激模块,高内涵成像模块等功能模块。
3)活细胞成像分析系统:ZEISS CD7结合Airyscan2可以超高分辨率对活细胞样本的动态变化进行低光毒性成像,IncuCyte S3可实现连续数天甚至数周的活细胞追踪并实时分析,此外部分宽场荧光显微镜及共聚焦显微镜也配备活细胞温控及二氧化碳培养装置。
4)高内涵活细胞分析系统:Opera Phenix Plus高内涵成像系统可从微孔板或者组织切片的样本中获得高质量图像,进行细胞计数、蛋白表达、细胞凋亡、蛋白转位、细胞活力、细胞迁移、受体内吞、细胞毒性、细胞周期和信号转导等分析。
6)激光显微切割系统:Leica LMD7和ZEISS PALM,可在显微镜下从样本中高度选择性地分离、纯化单一类型细胞群或单个细胞。
7)其他光学成像系统:生物影像平台跟据实际实验需求还配备了Olympus双光子显微镜,LiTone光片显微镜及组织透明化技术制样,Nikon Ti2-E荧光显微镜,包含TIRF,OKO活细胞成像温控系统功能模块。
8)图像处理及分析软件:Imaris、HALO,以及各类显微镜软件配置的反卷积、拼图、计数等分析模块。
9)细胞力学系统:包含Bruker光镊系统,可在显微镜下对微小物体进行的移位或手术操作,定量地研究分子间动态和静态的力学特性,定性地表征生物个体的生命过程;以及Bruker原子力显微镜,可测定材料表面3D形貌与物理性质表征,原位测定溶液中DNA、蛋白精细结构,测定分子间相互作用、细胞力谱、单分子力谱等。
10)生物成像样本制样设备:平台除了常规的冰冻切片、石蜡切片机及振动切片机外,还有超大型冰冻切片机CM3600XP、硬组织切片机HistoCoreNANOCUT、以及脱水机、石蜡包埋机、全自动免疫组化仪、玻片染封一体机等制样设备,满足制样中编号、脱水、包埋、切片、染色及封片的全流程的需求。
1)电镜及电镜制样设备:配备有冷冻透射电镜Tundra与蔡司扫描电镜Gemini 360,以及全套电镜切片制样设备(快速冷冻制样系统、半薄切片、常温超薄切片机、冷冻超薄切片机)。
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